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1.溶解氧 由于測試溫度設定在 20°C，冬季采集的樣品溶解氧過飽和，夏季采集的樣品可能在 20°C 時溶解氧欠飽和。 這些樣品應在 BOD5 測定之前進行攪拌和曝氣，以將溶解氧調節到 20°C 飽和點附近。 2.PH 試驗水樣的pH值應調節至6.7～7.5（最佳點為pH 7.2）。BOD5讀數的下降可能是由于被測樣品的pH值超過了這個范圍。對于含有大量酸或堿的樣品，BOD5 讀數可能會低于實際含量。 酸性或堿性水樣應用適當濃度的 NaOH 或 H2SO4 中和。 如果工業廢水含有酸或鹽的氧化物，或需要高倍稀釋，對于標準的五天 BOD5 測定，可以使用pH7.2的磷酸緩沖液作為稀釋劑。 3.溫度 實驗過程中將攪拌器置于20℃±1℃的培養箱中。BOD的測定也可以超過這個溫度范圍。 例如，在 35℃或 37℃ 時，測量 BOD 所需的時間可分別縮短至 2.5 天或 34 小時，測量結果與 20℃ 5 天相似。升高溫度得到的BOD值與5天在20℃下測得的結果有很好的相關性。 如果取樣時樣品溫度超過20℃，或樣品溫度低于20℃，可將樣品置于恒溫箱中恒溫。 樣品需要在樣品測量之前進行處理。 4. BOD5的稀釋 儀器的測量范圍為0～1000mg/L。如果測試樣品的 BOD5 估算值高于 1000mg/L，可用稀釋水稀釋樣品。加入的稀釋水也應保持在20℃，并應使用曝氣使氧氣飽和。如果需要測試幾個相同的樣品，應將足夠量的原始水樣稀釋，并從稀釋后的樣品中取出與測量范圍相對應的體積。例如，原水樣稀釋兩倍時，稀釋倍數為2；原水樣按1:10稀釋時，稀釋倍數為10。 5、BOD5的接種 什么是接種 BOD5實驗要求水樣含有供生物氧化的有機物和適量的氧化有機物的需氧細菌，以及吞食有機物和增進需氧細菌生長的其他微生物。如果水樣中根本沒有或幾乎沒有這類微生物，就必須對水樣按一定比例加入這類微生物溶液。這個過程應稱之為接種。 與生活污水不同，工業廢水可能不含有足夠量的細菌以供樣品中所含有機物完全的生化分解，如果所測定的樣品就是這種廢水，應加入接種溶液。 6、BOD5的接種方法 制備接種溶液 用于接種的溶液為20℃放置24～36小時的未經處理新鮮生活污水的上清液。 在接下來的實驗中，如果要使用之前測量的水樣作為接種液，則應通過濾紙過濾。該濾液應冷藏（約 20℃）并避光保存。一般兩個月內可能是有效的。 將待測樣品放入培養瓶中，用吸管向樣品中加入2～5滴接種液（視樣品量而定）。按照步驟測量BOD5，五天后得到的讀數可作為測試樣品的真實BOD5值。 注意：使用上述方法接種時。沒有必要校正接種的 BOD5 讀數。由于加入的接種量相對于水樣量來說太少，不會影響BOD5讀數。如果上述方法不能誘導水樣中有機物的生物降解，可以增加接種量。如果 BOD5 測定儀的讀數受到接種液添加的影響，可以同時測試接種液和樣品，進行平行樣品測定。 接種量常取1％，5％，10％三種。
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