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目前分光光度法只能測量有顏色或具有吸光度的水質樣品。如果被分析的水樣沒有顏色或吸光度值很小，那就需要水質分析人員在被測樣品中加入能與被測物質形成穩定且具有顏色物質的反應試劑。而這個過程就叫做顯色反應，這種試劑就叫做顯色試劑。另外，顯色反應在分析時與顯色試劑有關，且與顯色的條件有關。 在水質分析時選擇顯色反應條件的主要目的是讓待測成分在選擇的反應條件下，可以有效地轉化為適合光度分析的化合物。為了提高分析的靈敏度和準確度，需要選擇合適的顯色劑用量、溶液酸度、顯色時間和溫度等。 分光光度法的顯色反應條件 1、顯色劑的用量 在顯色反應中一般都加入適當過量的顯色劑，以使被測物質盡可能轉化為有色化合物，但并非顯色劑加得越多越好，顯色劑過多，則會發生其他副反應，對水質的分析不利。在實際工作中應該根據實驗要求常嚴格控制顯色劑的用量。 2、顯色溶液的酸度 有機顯色劑大部分是有機弱酸，溶液的酸度影響顯色劑的濃度以及本身的顏色。由于大部分金屬離子容易水解，酸度也會影響金屬離子的存在狀態，進一步還會影響有色化合物的組成和穩定性。因此，應通過試驗確定出適當的酸度范圍，并在水質分析過程中嚴格控制。 3、顯色反應時間 有些顯色反應能夠迅速完成且顏色穩定；有些顯色反應速率較慢，需放置一段時間，顏色才能穩定。因此，應該在顯色反應完成后，顏色達到最大深度(即吸光度最大)且穩定的時間范圍內進行分析。 4、顯色溫度 一般情況下，顯色反應多在室溫下進行，但有些顯色反應需加熱到一定溫度才能完成。因此，不同的顯色反應應選擇適宜的顯色溫度，并應注意控制溫度。 5、溶劑 溶劑的不同可能會影響顯色時間、有色化合物的離解度和顏色等。在分析時標準溶液和被測溶液應采用同一種溶劑。
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